第四节 免疫荧光染色方法及其操作

用荧光素标记的一抗直接与组织细胞特异性结合，即可在荧光显微镜下观察结果。直接法中只有抗原抗体特异性结合，没有连接其他抗体，所以特异性极高，非特异性染色少。但由于没有将抗原-抗体结合物放大，所以敏感性不及间接法。将抗体标记上荧光素→荧光抗体与组织细胞抗原结合→形成有荧光素的抗原-抗体结合物→激发光（紫外光）照射，荧光素发出可见荧光→荧光显微镜观察。阳性结果荧光呈明暗不一的亮黄绿色（FITC标记抗体）或橙红色（TRITC标记抗体）（图4-。必要时还可以选择非免疫正常血清，可供选择的封闭用正常血清有羊、兔和马血 ......