第三节　RNA纯度对荧光定量RT-PCR准确性的影响

本课题需要对体外培养的人肝细胞的两个基因分析其表达差异，所以我选用荧光定量RT-PCR技术，以β - actin为内参，进行基因表达差异分析。使用TRIzol试剂提取RNA ， MLV Reverse Transcriptase逆转录mRNA为cDNA ，然后荧光适时定量PCR扩增模板。理论上，实验组和对照组β - actin的Ct值的差异应小于2 ，但是扩增后的实际曲线显示对照组β - actin的Ct值大于实验组约4 ，也就是说其基因含量仅为实验组的1 / 10 （约1.8 -。这保证了我们的基因表达 ......