PCR引物的选择要注意以下几点:引物应该与外显子序列互补,或跨过外显子‐外显子的间隔区。5 ’端引物应该包含的序列不超过1 000bp以避免不充分的逆转录。引物应该用计算机软件匹配看是否特异性互补。大多情况下,解链温度等于或高于60℃可保证特异性。1 ﹒反应体系:引物(上游引物和下游引物的混合物)1 μ M 5 μ l. ......