虽然Sano等人构建的免疫PCR具有极高的灵敏度,但其所用的连接分子链亲和素蛋白A嵌合体没有商品化,因此限制了它在实际应用中的广泛普及。Ruzicka用此免疫PCR系统检测小鼠抗载脂蛋白E抗体,可以检测出包被浓度为10fg/ml的E抗体。后来有人对此作了改进,用生物素化的二抗和游离链亲和素作为连接分子进行免疫PCR实验,把每个步骤的洗涤次数从原先的7~15次减至3~5次,从而减少了操作时间,但不影响实验结果的准确性。随后在一系列实验中建立了各种夹心免疫PCR,扩大了检测范围。游离亲和素与固相中生物素化抗体 ......