(1)神经细胞处理与染毒同前,于接种后第7天检测。 (2)用0.25%胰酶-EDTA消化细胞,细胞量约为1×106,于4℃1000r/min 离心5分钟。 (3)悬浮细胞的染色:将正常培养和诱导凋亡的悬浮细胞(0.5×106~1×106)用PBS洗2次,加入100 l binding buffer和FITC标记的annexin-V(20 g/ml)10 l,室温避光30分钟,再加入PI(50g/ml)5 l,避光反应5分钟后,加入400 l binding buffer。 (4)立即用FACScan进行流 ......