基因转染人细胞后,有些细胞克隆所转染的基因是高表达,而有些克隆是低表达。有些研究需要对稳定转染的细胞克隆进行筛选。一般需要2个过程,一是药物筛选,二是克隆细胞株的转移和扩增。目前常用的这种标志有胸腺核苷激酶基因(tk)、二氢叶酸还原酶基因(dhfr)、氯霉素乙酰转移酶基因(cat)和新霉素磷酸转移酶基因(neo)。将24孔培养板每孔加入含有250μg/ml G418的选择性培养基2ml,用镊子取出黏附有克隆细胞的滤纸块,置于24孔培养基中,涮洗数次,以使滤纸上黏附的细胞脱下。细胞克隆位置的确定和处理同上。 ......