要大量提取质粒DNA,首先要在丰富培养基中扩增质粒,然后收获和裂解细菌。细菌的收获可采用低温离心的办法,细菌的裂解仍以碱裂解法最常用。封住瓶口,摇动离心瓶数次以混匀内容物,此时应不再出现分明的两个液相。未能形成致密沉淀块的原因通常是由于溶液Ⅲ与细菌裂解物混合不充分。用4层干酪包布把上清过滤至一250ml离心瓶中,加0.6体积的异丙醇,充分混匀,于室温放置10min。但下列情况下不易采用煮沸法:①未经氯霉素处理的培养物,这是由于未处理的培养物裂解后过于粘稠,不利操作。用聚乙二醇纯化质粒时,经过几次沉淀步骤, ......