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二、高效率的电击转化

与用化学方法进行转化的感受态细胞相比,制备电转化的感受态细胞要容易得多。细菌生长至对数中期,冷却、离心,用冰冷的缓冲液充分洗净以降低细胞悬液的离子强度,而后再用含10%甘油的冰冷缓冲液悬浮。当细菌受到短时高压电击时DNA可立即被导入(Chassyand Flickinger1987。另一种方法是在电击前将细菌速冷并冻存在- 70℃,冻存时间可长至6个月而不引起转化效率的降低。将转化混合物转移到预冷的电转化池中,轻击液体以确保细菌与DNA悬液位于电击杯底部。取不同体积(每90mm板最多可达200μl)的电击 ......

——《微生物耐药的基础与临床》
书名:《微生物耐药的基础与临床》
栏目:微生物耐药的基础与临床 > 第三篇 细菌耐药性研究及检测方法 > 第十八章 质粒的实验研究 > 第二节 质粒转化实验
作者:张卓然 夏梦岩 倪语星
参编:王镇山,沈继龙,杨彤,杨世杰,金红
页码:239-240
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2007-03-01
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