尽管核酸序列测定的方法越来越成熟与简便,但由于受测序胶长度及分辨率所限,一套测序反应一般只能测出有限的碱基数(500~1 000个核苷酸)。对于更长的DNA片段,则需考虑测序策略的问题。测序所采用的策略根据所测序列长度、要求精度及设施而有所不同。大规模DNA测序多采用从头测序,有随机法(鸟枪测序法)和定向法两种主要策略,其关键是获得连续的适于测序的较小片段。若要通过测序进行突变定位和鉴定(确证性测序),则采取不同的策略。这样可用一对共同引物完成所有序列分析。 ......