[文献资料]二、高效率的电击转化

与化学方法进行转化的感受态细胞相比，制备电转化的感受态细胞要容易得多。细菌简单地生长至对数中期，冷却、离心，用冰冷的缓冲液充分洗净以降低细胞悬液的离子强度，而后再用含10%甘油的冰冷缓冲液悬浮。当细菌受到短时高压电击时DNA可立即被导入。另一种方法是在电击前将细菌速冷并冻存在- 70 ℃ ，冻存时间可长至6个月并不引起转化效率的降低。电击法转化大肠埃希菌具有转化效率高、可转化的质粒DNA的范围扩大、方法简单，易操作，速度快等诸多优点，目前已得到越来越广泛的应用。特别是在需要转化率或大质粒转化的情况下，电击 ......