[辅助检查]五、测序过程常见问题分析与对策

解决对策：溶解DNA测序样品时，用灭菌蒸馏水溶解最好。DNA的测序反应也是Taq酶的聚合反应，需要一个最佳的酶反应条件。如果DNA用缓冲液溶解后，在进行测序反应时，DNA溶液中的缓冲液组分会影响测序反应的体系条件，造成Taq酶的聚合性能下降。解决对策：我们提倡穿刺培养菌或新鲜菌液。随机引物:如RAPD引物,随机引物一般都比较短，所用退火温度低，在测序反应条件下，不能很好地与模板结合。解决对策：大于2kb的PCR片段要测通最好是构建好克隆后再进行测序。这样模板更加稳定，测序效果也更好一些，用不断合成引物的方 ......

——《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》

书名：《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》

栏目：基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策 > 第一篇基因组学研究常用实验方法The Experimental Method Commonly Used i Genomic Researc > 第六章 cDNA克隆与DNA序列分析方法及常见问题对策(cDNA cloning, DNA sequence analysis methods and strategies frequently asked questions) > 第三节 DNA序列分析

作者：郭葆玉

参编：

页码：208-210

版本：1

出版社：人民卫生出版社

出版时间：2010-12-01

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