[辅助检查]二、磷酸化蛋白质的检测方法

由于磷酸化蛋白质在细胞内的含量较低，而且还存在同一种蛋白的非磷酸化形式的干扰，因此，对于用来检测磷酸化蛋白方法的基本要求就是要有较高的灵敏度和特异性。目前常用的有以下3种方法：免疫印迹和免疫沉淀。将磷酸化蛋白进行水解后，通过薄层层析的方法将水解后的氨基酸进行分离，再通过与磷酸化氨基酸标准品的迁移情况进行比较，即可确定蛋白质磷酸化氨基酸的类型，另外，采用二维磷酸肽作图法对水解后的产物进行分析也可以确定蛋白质的磷酸化氨基酸类型。 ......