第二节 核心技术

限制性内切酶可分为对甲基敏感的限制性内切酶和对甲基不敏感的限制性内切酶两种。由于第二对限制酶识别序列非常罕见，所以一般都用Hpa Ⅱ-Msp Ⅰ CCGG）。两个酶都识别CCGG序列，而当其中的胞嘧啶甲基化时，Hpa Ⅱ不能够将其切开，利用Hpa Ⅱ-Msp Ⅰ的这种属性处理DNA，这就使得Hpa Ⅱ-Msp Ⅰ能够作为快速甲基化分析的工具，随后进行Southem或PCR扩增分离产物，明确甲基化状态（图18-3）。采用甲基化DNA免疫共沉淀技术，通过5 ′-甲基胞嘧啶抗体与甲基化基因组DNA进行免疫共沉淀 ......