活细胞对光线是透明的,光线通过活细胞时,波长和振幅几乎没有改变,所以用普通光镜无法看清未经染色的活细胞。为了观察活细胞的结构,则需要通过其他途径提高结构的反差。20世纪30年代,荷兰物理学家Zernike设计的相差显微镜( phase contrast microscope )利用光的衍射和干涉特性,把透过标本不同区域的光波的光程差转变成振幅差,使细胞内各种结构之间呈现清晰可见的明暗对比。这种观察方法主要观察物体的轮廓,分辨不清内部的微细构造,只适合于观察活细胞内的细胞核、线粒体、液体介质中的细菌和霉菌等 ......