第七节 培养细胞的传代

贴附生长细胞长至瓶底的80%时，悬浮生长细胞当增殖至培养液开始变黄时均应及时传代。本节以贴壁生长细胞的传代为例。在显微镜下观察细胞的生长和健康情况，应该是细胞生长旺盛，进入对数生长期，接近融合。用酒精喷洒工作台和无菌台,从培养箱中取出细胞培养瓶。加入少量胰酶溶液,刚好浸没贴壁细胞（25ml培养瓶内加4ml，75ml培养瓶内加10ml），轻荡，静置1min。在显微镜下观察(细胞收缩),水平振荡直至细胞全部浮起（约需3min）。用于传代，或用于细胞冰冻保存。将10ml细胞悬液加到培养瓶中,培养瓶口火焰旁消毒。 ......