一、实时定量PCR技术的原理

实时定量PCR依靠荧光标记和自动化仪器，每次循环都可读出荧光强度，实时监测了反应进程中的PCR产物，从而更精确地实现了对起始模板的定量及定性的分析。实时定量PCR的基础在于起始的目的DNA量与循环过程的指数期的扩增产物量之间存在着定量关系，利用荧光信号的实时监测和计算，可以反映出这种定量关系。实时定量PCR仪由自动热循环系统、荧光检测系统及实时分析软件构成。如果同时扩增的还有标有相应浓度的标准品，线性回归分析将产生一条标准曲线，可以用来计算未知样品的浓度。 ......