样品制备是双向电泳中最关键的一步,它将直接影响双向电泳的结果。由于样品来源千差万别,对于每一个样品来讲,最好的提取蛋白的方法要通过多次实验来摸索。理想状态应使样品中的蛋白能完全溶解、解聚、变性、还原。样品的分级处理:通过采用亚细胞分级、液相电泳和选择性沉淀等方法对蛋白质样品进行分级处理,可降低样品的复杂性并富集低丰度蛋白质。至于大分子量蛋白少的原因可能是在变性条件下,蛋白质复合物变成了多肽,或者可能是大分子。 ......