[辅助检查]二、重组DNA的克隆筛选及鉴定

重组DNA的克隆化是利用单克隆细胞实现的。例如，将重组pUC18质粒转化大肠埃希菌后，由于pUC18携带抗氨苄西林的耐药基因，其转化的大肠埃希菌应该获得能在含氨苄西林的培养基上生长的特性，依据这一特性就可对重组DNA的转化进行初步筛选，然后经单克隆菌落的扩增培养即可获得一个克隆的重组DNA。采用抗性筛选时，需要注意使用抗生素的浓度，一般应以能杀死非转化菌的最低浓度作为抗生素的筛选用量，只有当出现一定程度耐药性时才需要加大抗生素的用量。根据载体序列设计跨越多克隆酶切位点的通用引物，采用菌落PCR法可以直接筛 ......