含蛋白50 μ g的样本在50 μ l Tris-HCl(pH8.2)中室温下孵育1小时,其中含1%烷基硫酸盐,2%两性电解质(ampholyte,pH4~。6),5 μ l β-巯基乙醇和10 μ l 8%蔗糖,然后直接加入电泳槽内。丙烯酰胺溶液:将30g丙烯酰胺、0.8g双丙烯酰胺和36g尿素溶于水,补足至100ml。在7ml丙烯酰胺溶液中加1.2ml ampholine液、1.7ml TEMED液、16ml 8mol尿素液和40mg过硫酸铵。在8℃下以250V电压电泳过夜,开始能量为3W /板,次日 ......