[辅助检查]五、PCR引物设计原则及影响PCR的因素

1 .引物应在核酸系列保守区内设计并具有特异性。PCR引物设计的目的是找到一个合适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。5 .延伸温度与时间Taq DNA聚合酶的生物学活性：在70～80℃，Taq DNA聚合酶每秒复制150核苷酸。10 .引物的5 ′端引物的5 ′端限定着PCR产物的长度，它对扩增特异性影响不大。1 .模板DNA不能有任何蛋白酶、核酸酶和Taq酶抑制剂。2 .引物尽量避免产生二聚体（3 ′端），引物浓度不宜过高，否则非特异性产物增多。Mg2 +浓度各种单核苷酸浓度为200 μ m ......