二、凝胶过滤层析法测定蛋白质相对分子量

凝胶过滤层析法主要是按照蛋白质的分子大小和形状分离不同的蛋白质，因此可以以分子量标准品为参照，测定样品蛋白质的Mr。凝胶过滤层析法分离蛋白质的原理及一般操作详见第九章第三节。这里仅介绍分子量测定的具体操作和注意事项。在用凝胶过滤柱层析法测定分子量时，根据待测样品的分子量选择适宜的凝胶过滤基质，最常用的是葡聚糖凝胶。如没有相应的仪器，也可以分部收集流出液（如每管3ml），再用紫外分光光度计测定各管的A280，计算出Ve。完成Ve测定后，以蛋白质分子量的对数为横坐标，Ve为纵坐标，作出标准曲线。也可以逐渐提高 ......