标本的厚度,如透光性和浑浊度可影响激光束的穿透深度。应用了某些人类工程学原理,即标本必须完全地适合显微镜的镜台,要观察的区域应当在显微镜镜头的工作距离之内。为观察合适的区域,有时必须以损失分辨率为代价。否则,使用不适当的镜头,可能造成标本被压碎或损伤。进行显微镜特定成像参数的设定操作,应在标本需要观察的特定区域以外,这样,可防止有价值的区域发生光漂白。因为,我们使用的不是100%的激光功率,另外,标本也不可能有均匀的荧光。 ......