四、逆向双杂交系统和三杂交系统

酵母双杂交技术在应用中发挥了巨大的作用，但人们也注意到了它有一定的局限性，为此发展了多种适应不同需求的改型双杂交技术。逆向双杂交系统（reverse two-hybrid system）用于检测能阻断两个蛋白质间相互作用的蛋白质结构，其设计大致可以分为两类。而在存活细胞中，引入的突变阻碍了蛋白质间的相互作用。待测蛋白质之间发生相互作用后首先表达抑制因子TetR，TetR结合到操纵序列后就抑制了报告基因HIS3的表达，结果转化子不能生长。RNA三杂交系统还可检测由RNA介导的两个蛋白质间的相互作用，也可筛选 ......