1 .酶切实验为微量操作,DNA样品与限制性内切酶的用量都极少,吸样量的准确性对酶切效果影响极大,为了保证最佳酶切效果,现推荐微量取样方法:吸样时,将tip尖刚刚接触到液面时,轻轻吸取。注意加样次序,即各项试剂加好后,最后才加酶,并要在冰上操作,且操作尽可能快,以使限制性内切酶拿出冰箱的时间尽可能短,若用同一酶消化很多样品时,可先计算出所需酶量(可稍多加一点),取出此量的酶与1 ×缓冲液混合,然后再分装至各个反应管内。5 .应尽量避免长时间酶消化样品,因长时间消化,限制性内切酶溶液中可能存在的杂酶会影响实 ......
——《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
书名:《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
栏目:基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策 > 第一篇 基因组学研究常用实验方法The Experimental Method Commonly Used i Genomic Researc > 第五章 DNA酶切与凝胶回收及常见问题对策(DNA digestion, gel extraction and strategies frequently asked questions) > 第一节 DNA的限制性内切酶酶切技术
作者:郭葆玉
参编:
页码:166-168
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2010-12-01