酵母双杂交实验虽然对蛋白质相互作用研究具有重要的推动作用,但是具体实施时也存在许多问题,需要在实验设计和实施中予以注意。现在实验室使用的均已是商品化的载体,各公司几经换代的各种酵母双杂交系统采用了多个报告基因,且每个报告基因的上游调控区又各不相同,这可减少大量的假阳性。另一个解决方案主要靠实验者自己完成,在检测两种蛋白质相互作用时必须有严格的对照,排除自激活作用的干扰。一些实际上没有任何相互作用但有相同基序的蛋白质,如两个亲α-螺旋的蛋白质间可以发生相互作用。酵母平板上的菌落在30℃下培养1周左右要及时转 ......