[辅助检查]四、PCR 反应条件的优化

但实际上，其技术是比较复杂的，而且迄今并没有完全清楚地了解其全部生化过程。反应体系中各种成分间的相互作用不断变化，其动力学行为决定了扩增产物的质和量。扩增后，电泳检测扩增效果，确定最佳酶浓度。酶浓度过高将增加非特异性扩增，酶浓度过低则使扩增产物的产量减少。Taq DNA聚合酶发挥活性需要Mg2 ＋参与，并且通过Mg2 ＋介导与模板DNA、引物及dNTP结合。因此，Mg2 ＋浓度的改变将直接影响引物的退火、模板与PCR产物的解链温度、产物的特异性、引物二聚体的形成、酶活性及扩增特异性等。引物浓度过高，将错误 ......