虽然目前荧光定量PCR技术日趋成熟,应用广泛,但仍存在一些问题有待解决。1 ﹒荧光定量PCR需要利用标准曲线进行定量,因而标准品的制备是一个必不可少的过程,但目前尚无统一标准,而且各个实验室所用的生成标准曲线的样品各不相同,致使实验结果缺乏可比性。3 ﹒由于荧光素种类少、不同荧光间的相互干扰大,以及检测光源的局限性,相对限制了荧光定量PCR同时检测多个靶基因的应用。目前已开发出多种荧光探针可以进行荧光定量PCR检测,如双链探针(复合探针)模式、引物‐探针模式、G淬灭探针模式以及单标记荧光探针与双链嵌入染料 ......