第八节 细胞的低温保存与复苏

细胞冻存的目的在于保存部分细胞，一方面是达到“保种”的目的，这是因为过度传代后的细胞会逐渐改变其原有的特性。另一方面是预防的目的，一旦发生污染，可以通过复苏的方法进行培养。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，这样可以以最大限度保存细胞的活力。复苏细胞与冻存的要求相反，应快速融化，以保证细胞外结晶短时间内融化，避免水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。根据冰冻前细胞密度以及存活细胞的期望值（至少60%）决定24孔板的每个孔中所应该加入的细胞悬液量（接种密度以5 × 105／ml为宜，不能过低）。 ......