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[辅助检查]（二）单链DNA探针放射性标记方法

合成单链DNA探针可将模板序列克隆到M13噬菌体载体中，以此为模板，以通用引物或人工合成的寡核苷酸为引物，在α‐32P‐dNTP的存在下，由大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ Klenow大片段合成放射标记探针。用适当的限制性内切酶切割这些长短不一的产物，然后通过变性凝胶电泳将探针与模板分离开。双链RF型M13DNA也可用于单链DNA的制备，选用M13通用引物即可制备正链或负链单链DNA探针。但由于模板RNA中通常含有多种不同的RNA分子，所得探针的序列往往比以克隆DNA为模板所得的探针复杂得多，应预先富集mRNA中 ......

——《人体寄生虫学实验研究技术》
书名：《人体寄生虫学实验研究技术》
栏目：人体寄生虫学实验研究技术 > 第五篇 寄生虫分子生物学技术 > 第十七章 分子杂交技术 > 第一节 DNA探针与RNA探针的制备 > 二、标记方法分类
作者：李朝品
参编：王勇，王中全，王克霞，古钦民，朱玉霞
页码：396
版本：1
出版社：人民卫生出版社
出版时间：2008-05-01
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