[概述]二、ES细胞分离、培养

用于分离ES细胞的胚胎的胎龄越小，分化程度越低，具有全能性的ES细胞含量越高。动物胚胎来源于正常受孕雌性动物的胚胎或体外受精卵。由于人ES细胞研究的特殊性，受到伦理学和法律的限制，常来源于流产胚胎、体外受精卵或异种核移植胚胎。当囊胚贴壁, ICM增殖后，用0.25%胰蛋白酶和0.04%EDTA的消化液，将ICM离散并移入新的含有PMEF饲养层细胞的四孔板中，继续培养4～5d后，观察各种细胞集落出现的情况。培养过程中，注意观察ES细胞分化的征象：①团块被扁平细胞所包围。团块看起来像单个细胞组成而不是细胞群. ......