胶原蛋白酶Ⅳ(以1640培养液稀释成浓度为0 ﹒ 05mg/m l按100 μ l分装后储存于- 80℃备用)。将麻醉过的小鼠主动脉放血。切除肺脏并浸泡于HBSS+5%FCS中。用剪刀将肺脏剪成直径约0.5cm大小的组织块并移至离心管中。室温下200×g离心5分钟。于离心管中加入消化缓冲液:30ml HBSS, 5ml FCS,5ml分散酶Ⅱ,80 μ l胶原蛋白酶Ⅱ,80 μ l胶原蛋白酶Ⅳ。37℃水浴75分钟。将沉淀移至研磨器中充分研磨后收集于15ml无菌的离心管中。将收集的上清液离心弃上清,加入HB ......