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[辅助检查](二)双链cDNA的合成

DNTPs混合物(1 ∶ 5稀释)50 μ L。按上述量在冰浴中混合,最后加入酶(Klenow大片段),15℃水浴保温20h或过夜,然后42℃水浴温育75min。加入0.5mol/L EDTA 10 μ L,加入等体积TE的饱和酚,氯仿/异戊醇(1 ∶ 1,W/V)抽提2次,离心分相,吸出上层水相。将上层水相经过TNE平衡的SephadexG-50柱,TNE缓冲液洗脱,用Ep管收集组分并测定放射性强度。 ......

——《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
书名:《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
栏目:基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策 > 第一篇 基因组学研究常用实验方法The Experimental Method Commonly Used i Genomic Researc > 第六章 cDNA克隆与DNA序列分析方法及常见问题对策(cDNA cloning, DNA sequence analysis methods and strategies frequently asked questions) > 第一节 cDNA的合成和克隆 > 三、操作步骤
作者:郭葆玉
参编:
页码:191-192
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2010-12-01
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