在蛋白质组研究中,我们会用到细胞培养技术,观察细胞在不同生理条件下的蛋白质组的动态变化。培养细胞总蛋白的提取方法有很多种,包括胰蛋白酶酶解后裂解法、培养皿上直接裂解法和热SDS裂解法等。下面简要介绍培养皿上直接裂解法:1 .贴壁培养在培养皿中的细胞,待培养至80%左右密度时,细胞用预冷的溶液洗涤3次(应当选用不裂解细胞的洗涤溶液,如等渗缓冲液PBS等),以去除在生长培养基中的任何物质。7 .蛋白样品溶液分别小量分装,80℃保存,如长期保存,最好在细胞沉淀状态下液氮冷冻后,80℃保存。 ......