[辅助检查]第三节 目的基因与载体的连接

将获得的质粒载体与目的基因分别酶切后进行连接，根据目的基因末端和拟插入的载体的位点情况，可采用不同的连接方法，主要有：①黏端DNA片段间的连接。目的基因片段与载体分子之间并不总是互补的黏性末端，经常会遇到非互补的黏末端，这时就不再适用黏末端连接法，另外有些限制酶水解DNA会产生平头末端，如Alu Ⅰ、Bal Ⅰ等。如果外源DNA和载体分子一侧为相互匹配的黏性末端，另一侧为非互补黏末端或平端，则外源DNA片段只能以一个方向插入载体，这种一侧为互补黏末端或平端另一侧为黏端进行的目的基因和载体的连接称为黏-平末 ......