抗体重链可变区(V H)和轻链可变区(VL)基因分别由4个相对保守的骨架区(FR)和3个互补决定区(CDR)组成。因此可从杂交瘤细胞或脾细胞中提取mRNA,反转录成cDNA,根据FR的碱基组成设计引物,用PCR方法扩增V H和VL基因,并以Linker连接VL的C端和V H的N端或连接V H的C端与VL的N端,构建成抗体基因或基因片段。减少蛋白酶的攻击,防止抗体聚集。Linker的引入不影响抗体的二级结构,有助于保持抗体的天然结合力和稳定性。在杂交瘤细胞中,编码抗体轻、重链的mRNA已经被剪接并已富集达3 ......