除上述自动激光荧光DNA测序技术外,还有其他多种测序新技术在实际工作中得到应用或正在研发。本节主要介绍焦磷酸测序、第二代和第三代测序技术。焦磷酸测序(pyrosequencing)是一种基于发光法测定焦磷酸(PPi)的测序技术,其原理如图4-5所示。焦磷酸测序技术的三个关键点分别是:①反应中使用dATP的类似物dATP α S,因为dATP的结构与ATP相似,能与荧光素反应发出荧光,而dATP α S几乎不产生背景荧光。焦磷酸测序技术操作简单,结果准确,可用于单核苷酸多态性位点分析、等位基因频率测定、细菌 ......