悬浮生长的细胞必须在软琼脂(agar)培养基内增殖才能形成克隆。软琼脂克隆形成法通常在塑料培养皿中进行,由两层琼脂构成,上层为接种层,含有细胞,琼脂浓度为0.3%~0.4%。上层软琼脂可使细胞分散成单个,下层软琼脂作为支撑可防止细胞贴附生长。5 ﹒铺上层琼脂取预温37℃的细胞悬液9.4ml,移入小烧杯中,加入50℃的5%琼脂0.6ml(0.3%琼脂+细胞),迅速混匀,加到底层琼脂的上面,每皿1ml,室温水平静置,使软琼脂凝固。3 ﹒用B16细胞进行软琼脂克隆形成试验时,必须在底层琼脂中加入少量大鼠红细胞。 ......