第二节 基本方法

目前，DNA测序仪的工作原理主要有第一代测序技术的化学降解法、双脱氧链末端终止法以及第二代测序技术的高通量测序法。化学降解法和双脱氧链末端终止法在原理上虽然不同，但都是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，产生A、T、C和G四组不同长度的一系列核苷酸，然后在变性的聚丙烯酰胺凝胶上电泳检测，从而获得DNA序列。二代测序技术与一代测序都是基于碱基配对原则，但采用了高通量技术，使测序通量大大提高。化学切割反应包括：碱基的修饰，修饰的碱基从其糖环上转移出去，在失去碱基的糖环处DNA断裂。图1 ......