从siRNA的应用实践来看,其沉默基因表达的效率可介于10%~90%之间。主要有两方面因素制约着siRNA对基因的沉默效率,即细胞方面的因素和siRNA分子本身的因素。细胞因素指siRNA进入细胞的转染效率,有研究发现,同一siRNA分子对不同的细胞进行转染时,沉默基因的效率是有差异的。在不能改变细胞的情况下,siRNA序列的设计在其应用中就占有重要地位了,siRNA的设计都应遵循的基本原则见表16-4。下面以质粒载体为例,具体介绍siRNA的合成方法及其应用(实验流程16-4)。 ......