ES细胞的培养是基因剔除实验的技术关键,所有的目标是保持ES细胞的分化全能性,采用滋养层细胞(也有些ES细胞株可以不用滋养层细胞)和白血病抑制因子( leukaemia inhibitory factor , LIF )对抑制ES细胞的分化和保持ES细胞的分化全能性具有非常重要的意义。在培养过程中要密切注意细胞的密度, ES细胞在细胞培养板上生长密度太稀和太密都会影响ES细胞的生长和分化,因此要把握好细胞传代的时机,同时在胎牛血清(包括批号)的选择、水质量的控制、培养液的酸碱度等方面也要认真关注。 ......