凝胶过滤层析的基本原理是分子在多孔介质颗粒孔隙中的液相与介质颗粒外部的液相之间按分子大小不同得到分配。一般情况下,都是在层析柱中填入珠状多孔凝胶材料并浸透流动相,如图11‐31。理想的凝胶过滤介质具有高物理强度及化学稳定性,能够耐受高温高压、强酸强碱、高化学惰性、内孔径分布范围窄、颗粒大小均一度高的珠状颗粒。凝胶过滤介质的排阻范围是指介质能够分离的球状蛋白质的分子量范围,例如表中列举的Sepharose6B的排阻范围是10~4000k D,表示该介质理论上可以分离分子量在。稳定性:由于原料种类千变万化,其p H、温度以及有无有机溶剂等因素会否影响介质的分离特性等问题需要事先以小量试验摸索清楚。
……