五、免疫磁珠法分离CD34阳性造血干／祖细胞

根据造血干／祖细胞表面表达CD34分子抗原，利用抗CD34分子单克隆抗体和相应免疫磁珠系统分离与纯化CD34阳性细胞。单个核细胞悬液的制备:按常规密度梯度离心法制备单个核细胞悬液,然后将细胞悬浮于含0.5%BSA和5mmol／L EDTA的PBS缓冲液中，并将细胞密度调整到1 × 106～2 × 106／ml，待用。MACS(magnetic cell sorting)系统分离CD34阳性细胞:将细胞悬液加入分离柱中,然后把分离柱固定在MACS磁场内（永久性磁场，场强0.6T），用缓冲液将未吸附的细胞洗去，收集吸附有磁珠的细胞即可。该法分离的细胞纯度可达99%以上,细胞得率在50%～70%左右。