三、酶联免疫分析法

应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中cA MP水平。用纯化的抗体包被微孔板制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入cA MP抗原、生物素化的抗兔cA MP抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物T MB显色。T MB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。每孔加生物素标记抗体工作液100 μ l（取1 μ l生物素标记抗体加99 μ l生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃，60分钟。洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。