例一 马奎蓉等以DBD‐Py NCS手性衍生化HPLC法分离异丙肾上腺素对映体

色谱条件Diamonsil C 18色谱柱（150 mm × 4 ﹒ 6 mm，5 μ m）。手性衍生化方法：分别取DBD‐Py NCS乙腈溶液（36 mmol／L）、以2 mmol／L依地酸二钠水溶液配制的异丙肾上腺素对映体溶液（1 mmol／L）、20%吡啶乙腈溶液各10 μ l，混合于聚丙烯管中，涡旋混合1 min，在金属恒温仪遮光65℃条件下反应35 min。结果异丙肾上腺素两对映体的α为1.20，R为6.25。DBD‐Py NCS浓度大于异丙肾上腺素浓度的36倍时，衍生物色谱峰最高且稳定。过量的DBD‐Py NCS与衍生物有很好的分离度，不影响异丙肾上腺素对映体的分析。取衍生化反应温度40～75℃、时间25～50 min考察，发现65℃下反应35 min的衍生化效果最好。