梯度洗脱一般采用二元流动相梯度(溶剂A和溶剂B),其中洗脱能力强的溶剂B的浓度(%B)在运行中不断增加,溶剂B的增加方式一般有三种变化图形,即线性梯度、曲线梯度、分段梯度,如图13 - 12所示[ 4 ]。