（二）去除蛋白质

在测定血样时，首先应去除蛋白质。去除蛋白质可使结合型的药物释放出来，以便测定药物的总浓度。去除蛋白质也可预防提取过程中蛋白质发泡，减少乳化，还可以保护仪器（如保护HPLC柱不被污染）、延长使用期限。去除蛋白质有以下几种方法。加入水溶性的有机溶剂，可使蛋白质的分子内及分子间的氢键发生变化而使蛋白质凝聚，使与蛋白质结合的药物释放出来。通常分离血浆或血清用的离心机（3 000r／min）不能将蛋白质沉淀完全，而采用超速离心机（10 000r／min）离心1～2min便可将析出的蛋白质完全沉淀。蛋白沉淀后可用离心或过滤除去，这种方法最简单，但只能除去热变性蛋白。