50mmol/L Tris‐柠檬酸pH7.1。在竞争结合实验中,加入反应管中受试药物的浓度可在10 - 4~10 - 10 mol/L之间适当选择若干浓度点,求出各浓度抑制受体与[ 3H ] GABA结合的百分数,用Logit转化法作图,求得IC50和K1值。用同一组数据代入Hill方程,作图求得Hill系数以确定受体是否存在合作关系。在制备P2膜时, P2膜至少冻3天以上,因为反复冻融、洗涤可以去掉组织中的内源性抑制因子(如GABA受体复合物中的调变蛋白和内源性GA‐BA等),使受体活性提高。抽滤、冲洗滤膜时要尽量操作迅速,最好不超过30s,因为时间过长,部分受体有可能解离而降低受体—配体结合数目。则可对抗苦味毒的致惊作用,若为拮抗剂则否。
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