在传统的体内、外培养法筛选生产用弱毒株毒种时,大多数病毒疫苗毒种的减弱程度可以达到对人体安全水平,不必要进行空斑挑选法纯化。小蚀斑的病毒一般毒力较低,因此在挑选病毒形成的空斑时,应选择形状较小的、斑与斑之间有一定距离的孤立空斑,用眼科小镊子或弯头小毛细管通过琼脂层将空斑区的琼脂连同下层的细胞一起取出。立即接种已备好的细胞进行下一代空斑克隆挑选或通过细胞培养增殖后再作下一代空斑克隆,如此进行数次的克隆纯化达到空斑形状大小均一,经过全面检定,包括对动物传代无毒力回升返祖后,即可保留毒种作为生产用原始种子。
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