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三、酶联免疫吸附(ELISA)检测法

凋亡细胞的DNA在钙‐镁依赖性核酸酶作用下,在核小体间被切割,产生180~200bp或其倍数的核小体片段。由于核小体与组蛋白形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法,应用抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体与核小体片段形成夹心结构,可特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。细胞类别和细胞凋亡诱导剂不同时,ELISA所需细胞数及反应条件也可能不同,如包被抗体稀释度(参考:2.5 μ g/ml,每孔100 μ l)、底物浓度(底物缓冲液中加入底物的量,参考:0.5mg/ml),以及酶标抗体浓度(参考:40~4000倍,需滴定)等。

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——《药理实验方法学》
书名:《药理实验方法学》
栏目:药理实验方法学 > 第四篇 细胞与分子药理学技术 > 第九章 细胞和亚结构的分离技术与细胞凋亡的测定方法 > 第二节 细胞凋亡的测定方法
作者:魏伟 吴希美 李元建
参编:王广基,吴希美,吴春福,张永祥,李元建
页码:266-267
版本:4
出版时间:2010-05-01
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