凋亡细胞的DNA在钙‐镁依赖性核酸酶作用下,在核小体间被切割,产生180~200bp或其倍数的核小体片段。由于核小体与组蛋白形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法,应用抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体与核小体片段形成夹心结构,可特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。细胞类别和细胞凋亡诱导剂不同时,ELISA所需细胞数及反应条件也可能不同,如包被抗体稀释度(参考:2.5 μ g/ml,每孔100 μ l)、底物浓度(底物缓冲液中加入底物的量,参考:0.5mg/ml),以及酶标抗体浓度(参考:40~4000倍,需滴定)等。
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