采用机械分离的方法每只新生大鼠可获得数百个破骨细胞。由于骨组织中破骨细胞含量少、代谢旺盛,对环境因素较敏感,在分离培养过程中易受损伤,获得足够量实验需要的培养破骨细胞有一定难度。低温快捷操作可减少破骨细胞损伤和分离容器黏附。兔和禽长类骨破骨细胞分离培养也可参照本文方法和相关文献。其他如提高细胞纯度的技术也可酌情采用,但需注意这些过程对破骨细胞活力的影响。